观察Toll样受体4(TLR4)与胰腺癌PANC1细胞对吉西他滨(GEM)敏感性的关系，探讨其相关机制。
方法将PANC1细胞分为GEM组、脂多糖(LPS)＋GEM组、TLR4-siRNA＋GEM组。GEM组给予GEM处理，LPS＋GEM组先用1 mg/L的LPS干预4 h后再用GEM处理，TLR4-siRNA＋GEM组先用100 pmol/ml TLR4-siRNA转染细胞4 h后再用GEM处理。以不做任何处理的细胞作为对照组。采用MTT法检测各组细胞的增殖，Hoechst33258染色观察细胞形态学变化，流式细胞仪检测细胞凋亡率，蛋白质印迹法检测细胞TLR4、磷酸化AKT(p-AKT)、活性Caspase-3蛋白表达。
结果GEM组、LPS＋GEM组、TLR4-siRNA＋GEM组GEM对PANC1细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为(8.90±0.62)、(14.21±0.95)、(3.96±0.27)mg/L，LPS＋GEM组显著高于GEM组，TLR4-siRNA＋GEM组显著低于GEM组，差异均有统计学意义(P值均<0.01)。LPS＋GEM组典型凋亡形态学改变的细胞数较GEM组减少，而TLR4-siRNA＋GEM组则较GEM组增多；对照组、GEM组、LPS＋GEM组、TLR4-siRNA＋GEM组细胞凋亡率分别为(2.1±0.3)%、(15.1±2.3)%、(9.8±1.5)%、(22.9±3.1)%，LPS＋GEM组显著低于GEM组，TLR4-siRNA＋GEM组显著高于GEM组，差异均有统计学意义(P值均<0.01)。4组的TLR4表达量分别为0.83±0.08、0.81±0.07、0.85±0.07、0.16±0.03；p-AKT表达量为0.61±0.05、0.36±0.03、0.73±0.07、0.21±0.02；活性Caspase-3表达量为0.66±0.05、0.73±0.07、0.45±0.04、0.91±0.07。TLR4-siRNA＋GEM组的TLR4、p-AKT表达均较GEM组显著下降(P值均<0.01)，而活性Caspase-3表达显著增高(P<0.05)。LPS＋GEM组的p-AKT表达较GEM组显著增加(P<0.01)，而活性Caspase-3蛋白表达显著减少(P<0.01)。
结论TLR4可抑制胰腺癌PNAC1细胞对GEM的敏感性，其机制可能与激活PI3K/AKT通路，下调活性Caspase-3表达有关。