【摘 要】
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采用重氮化法合成氯霉素人工抗原。通过紫外扫描、凝胶电泳、基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MAL-DI-TOFMS)鉴定人工抗原。用该人工抗原免疫兔子,获得多抗血清。采用酶联免疫
【机 构】
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浙江大学生物系统工程与食品科学学院;
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划项目(No.2007AA10Z436)
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采用重氮化法合成氯霉素人工抗原。通过紫外扫描、凝胶电泳、基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MAL-DI-TOFMS)鉴定人工抗原。用该人工抗原免疫兔子,获得多抗血清。采用酶联免疫法测定抗体效价,并对ELISA条件进行初步优化。选择与氯霉素结构相似的4种药物进行交叉反应,计算交叉反应率。结果表明免疫抗原偶联率为1∶22,最佳包被抗原质量浓度为0.25μg/mL,抗体效价128000。优化后,通过间接竞争ELISA法建立标准曲线,IC50为0.26μg/mL,4种药物与抗体的交叉反应率均小于0.1%,特异性显著。
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