【摘 要】
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目的 探讨以先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)婴幼儿骨髓间充质于细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)作为种子细胞于体外构建组织工程化心肌组织的可行性.
【机 构】
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山西医科大学第二医院胸心外科,上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心心胸外科
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目的 探讨以先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)婴幼儿骨髓间充质于细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)作为种子细胞于体外构建组织工程化心肌组织的可行性.方法 分离培养CHD婴幼儿胸骨BMSCs,经5-氮杂胞苷诱导分化为心肌细胞,种植到可降解的载体--聚乳酸/羟基乙酸的共聚物(polyactic acid/glycolic acid homoconjugate,PLGA)上,加入含有10%胎牛血清的LG-DMEM培养液,摇床培养1周后种植到裸鼠背部皮下,分别在种植后1、2、3周处死裸鼠.实验终止后通过光学显微镜、常规HE染色、蛋白质印记(Western Blotting)和透射电镜观察等对构建的组织工程化心肌组织进行评价.结果 骨髓间充质干细胞经定向诱导分化后与PLGA构建的细胞-支架复合体培养1周后可见大部分细胞存活,有大量的细胞外基质分泌,植入裸鼠体内后3周取出标本大体观察可见组织样结构形成,Western blot检测结果表明构建的心肌组织有心房利钠肽(ANP)和心肌特异性肌球蛋白重链(MHC)的表达,透射电镜下可见体外构建的工程化心肌具有肌丝,缝隙连接和闰盘样结构形成.结论 以CHD婴幼儿BMSCs为种子细胞,PLGA为支架构建组织工程化心肌可行,构建的组织工程化心肌具有自体心肌的特性.
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