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以牛分枝杆菌（Mycobacterium boris）Vallee111株染色体DNA为模板，以RecA基因特异性引物进行PCR扩增，获得约240bp的DNA片段。将PCR产物克隆至pMD^TM 18-T Vector中，通过α-互补法筛选、质粒PCR鉴定及序列分析鉴定，成功构建出了重组质粒pMD^TM 18-T—RecA，为进一步研究RecA基因及其在牛结核病诊断中的应用奠定了基础。