Flag-p107真核表达载体的构建及其在ECA109细胞表达及鉴定

来源 :贵州医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zoufan20007

【摘要】

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目的构建N端含flag标签的p107的真核表达载体,及其在EC109细胞表达的鉴定。方法设计引物在p107蛋白N端增加flag标签,通过PCR扩增获得3×flag-p107cDNA片段,将此片段插入

【作者】

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来雯婷崔元龙刘伊宁李晓苗吉别克·瓦提别克

【机构】

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新疆医科大学基础医学院,新疆医科大学中心实验室,新疆医科大学附属肿瘤医院

【出处】

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贵州医药

【发表日期】

：

2017年2期

【关键词】

：

视网膜母细胞瘤样蛋白I 真核表达载体分子克隆基因表达 p107 eukaryotic expression vector molecular clonin

【基金项目】

：

国家自然科学基金（项目编号：81660459）

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目的构建N端含flag标签的p107的真核表达载体,及其在EC109细胞表达的鉴定。方法设计引物在p107蛋白N端增加flag标签,通过PCR扩增获得3×flag-p107cDNA片段,将此片段插入真核表达质粒CMV-MCS-SV40-Neomycin中;再与质粒CMV-MCS-SV40-Neomycin连接,将所得的融合基因进行PCR、酶切及DNA测序验证正确后,利用电转染将其转染至ECA109细胞中;利用Western-Blotting检测融合蛋白CMV-MCS-3flag-p107-SV4

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