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通过确定包被抗体最佳稀释度（anti-β-CN IgY1：160）、封闭液及封闭时间（含1%明胶的PBST,封闭1h）、酶标抗原（1：20）和待测脱脂牛乳样品稀释液（1：80）抗体作用时间（60min）、底物最佳反应时间（20min）、温度（37℃）等对竞争ELISA效果有重要影响的因素,建立检测牛乳β-酪蛋白的竞争ELISA法。经敏感性实验和重复性实验证明本实验建立的竞争ELISA法最低检出量为5.1μg/mL,变异系数（CV）小于5%,可以开发应用于牛乳及其制品的蛋白质品质快速检测。