pBabe-GLS1真核表达载体构建及其对结肠癌细胞增殖、谷氨酰胺摄取的影响

来源 :山东医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：Virgin1988

【摘要】

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目的构建pBabe-GLS1真核表达载体,观察谷氨酰胺酶1（GLS1）对结肠癌细胞增殖及谷氨酰胺摄取的影响。方法运用反转录PCR扩增GLS1基因片段,通过Bam HⅠ和SalⅠ双酶切目的片段并通过

【作者】

：

李雅莉黄建玲金鑫张波

【机构】

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西安交通大学医学院附属3201医院

【出处】

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山东医药

【发表日期】

：

2017年41期

【关键词】

：

结肠癌细胞谷氨酰胺酶1 细胞增殖谷氨酰胺

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目的构建pBabe-GLS1真核表达载体,观察谷氨酰胺酶1（GLS1）对结肠癌细胞增殖及谷氨酰胺摄取的影响。方法运用反转录PCR扩增GLS1基因片段,通过Bam HⅠ和SalⅠ双酶切目的片段并通过T4 DNA连接酶将GLSⅠ基因连接至pBabe真核表达载体中;经BamHⅠ和SalⅠ双酶切法、PCR法测序鉴定重组DNA分子;转染组将构建的pBabe-GLS1真核表达载体瞬时转染结直肠癌HT29细胞,阴性对照组转染空质粒pBabe,采用Western blotting法检测GLS1蛋白表达,通过谷氨酰胺含量检

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