【摘 要】
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以GST-AQP7(Aquaporin 7)融合蛋白的原核表达为例,进行了生物学开放性实验教学的实践与探讨.利用PCR技术快速扩增小鼠AQP7-C末端亲水性肽段区基因片段,构建重组表达载体pGEX-4T
【机 构】
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潍坊学院生物与农业工程学院山东省高校生物化学与分子生物学重点实验室
【基金项目】
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山东省优秀中青年科学家科研奖励基金项目(BS2013SW036),潍坊市科学技术发展计划资助项目(2017GX022),潍坊学院博士科研基金项目(2012BS20),山东省应用基础研究提升计划(2014ZRB01AAC)
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以GST-AQP7(Aquaporin 7)融合蛋白的原核表达为例,进行了生物学开放性实验教学的实践与探讨.利用PCR技术快速扩增小鼠AQP7-C末端亲水性肽段区基因片段,构建重组表达载体pGEX-4T-1∕AQP7,转化表达菌株 E.coli BL21,诱导表达GST-AQP7融合蛋白,并对目的蛋白亲和层析纯化.PCR鉴定和DNA测序结果表明,pGEX-4T-1∕AQP7重组表达载体构建正确,SDS-PAGE蛋白电泳结果证实GST-AQP7高效表达并成功纯化.经过上述实验过程,学生系统掌握了从基因操作到
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