蜂素信号肽介导猪干扰素-γ在杆状病毒中分泌表达及抗病毒活性检测

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：woai894781693

【摘要】

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应用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统,将编码成熟的猪干扰素-γ基因插入供体质粒pFastBacTM1polyhedrin启动子控制下的多克隆位点,引入昆虫细胞可识别的蜂素信号肽（Honey

【作者】

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王彦彬魏战勇陈红英王建举郭小参崔保安

【机构】

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河南农业大学牧医工程学院

【出处】

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中国兽医学报

【发表日期】

：

2010年11期

【关键词】

：

猪干扰素杆状病毒抗病毒活性

【基金项目】

：

国家“十一五”科技支撑计划资助项目(2006BAD06-A08)

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应用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统,将编码成熟的猪干扰素-γ基因插入供体质粒pFastBacTM1polyhedrin启动子控制下的多克隆位点,引入昆虫细胞可识别的蜂素信号肽（Honeybee melittin signal peptide）取代猪干扰素-γ原有信号肽以实现在昆虫细胞中分泌型表达,并在C端融合6个组氨酸标签以利于纯化。将构建质粒转化DH10Bac感受态细胞获得重组穿梭载体质粒,转染对数生长期的Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒。重组蛋白通过SDS-PAGE、间接免疫荧光、Wes

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