【摘 要】
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目的 研究5-羟色胺(5-HT)介导的肺动脉平滑肌细胞增殖是否与细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)升高有关,并明确NADPH氧化酶(NADPH oxidase,NOX)在ROS产生及可能由此
【机 构】
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400038重庆,陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院麻醉科;401320重庆,重庆市巴南区人民医院手术麻醉科
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目的 研究5-羟色胺(5-HT)介导的肺动脉平滑肌细胞增殖是否与细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)升高有关,并明确NADPH氧化酶(NADPH oxidase,NOX)在ROS产生及可能由此导致的肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用.方法 组织块法建立人肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)细胞系.分别设置正常对照组,不加任何药物;5-HT组,给予5-HT(1 μmol/L)刺激细胞;各干预组分别给予ROS清除剂Tempol(100 μmol/L)、NOX抑制剂DPI(20 μmol/L)、ERK抑制剂PD98059(30 μmol/L)预处理,再加入5-HT刺激不同时间.处理完成后测定各组NOX活性,采用DCF-DA荧光探针检测细胞内ROS的生成,3H-TdR掺入法检测PASMCs的增殖,免疫印迹杂交法检测ERK1/2磷酸化水平.结果 研究发现5-HT刺激可明显增强NOX活性(P＜0.05),引起ROS的增加(P＜0.05),DNA合成增加(P＜0.05),ERK1/2磷酸化水平增加(P＜0.05).NOX抑制剂(DPI)、ROS清除剂(Tempol)或ERK抑制剂PD98059均能显著地逆转5-HT刺激引起的ERK1/2磷酸化及DNA合成水平的增加(P＜0.05),NOX抑制剂(DPI)能显著地逆转5-HT刺激引起的ROS增加(P＜0.05).结论 NOX/ROS可能是5-HT介导的PASMCs增殖信号转导重的重要蛋白.
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