体外直接共培养兔肾血管内皮细胞和成骨细胞

来源 :中华小儿外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xieym28
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目的 观察兔肾血管内皮细胞(renal vascular endothelia cells,RVECs)和兔骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,RMSCs)诱导的成骨细胞(osteoblasts,OB)直接共培养是否具有良好的细胞相容性,探索二者共培养的合适比例.方法 抽取兔骨髓,离心法获取RMSCs,经条件培养基获得OB并鉴定;取兔双肾行三步梯度筛网法获得RVECs并鉴定.二种细胞按OB与RVECs 3:1、2:1及1:1比例直接共培养及各自单独培养,倒置显微镜及Masson染色观察生长情况,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色观察细胞增殖分化能力.结果 共培养细胞增殖快于单一细胞,OB与RVECs 2:1比例培养优于3:1和1:1,增殖最快.从OB的ALP染色阳性率看,和RVECs共培养的OB染色阳性率比单纯OB高,OB与RVECs 2:1比例培养的阳性率最高,表明RVECs能显著增强OB的ALP活性.结论 RVECs和RMSCs诱导的OB体外直接共培养具有良好的细胞相容性,可促进OB的增殖分化,促进其ALP的分泌,提高OB的成骨能力.二者按OB与RVECs 2:1混合培养是较佳比例。

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