目的:HPLC法同时测定小儿柴桂退热颗粒中葛根素、大豆苷、黄芩苷、大豆苷元、桂皮醛、黄芩素的含量。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱(0~5 min,93%B;5~20 min,93%B→89%B;20~23 min,89%B→85%B;23~30 min,85%B→83%B;30~35 min,83%B→77%B;35~50min,77%B→52%B;50~53 min,52%B→15%B;53~55 min,15%B),流速1.0 mL·min-1,检测波长250 nm(0~35 min,测定葛根素和大豆苷)、270 nm(35~48 min,测定黄芩苷和大豆苷元)、290 nm(48~50.5 min,测定桂皮醛)、278 nm(50.5~55 min,测定黄芩素),柱温40℃。结果:葛根素、大豆苷、黄芩苷、大豆苷元、桂皮醛、黄芩素进样量分别在0.01240~2.480、0.004208~0.8416、0.005503~1.101,0.002132~0.4264、0.0007120~0.1424、0.0007980~0.1597μg范围内与峰面积均有较好的线性关系,平均加样回收率均在99.0%~101.2%范围内,RSD均小于1.3%。结论:经方法学验证,本法可用于小儿柴桂退热颗粒中葛根素、大豆苷、黄芩苷、大豆苷元、桂皮醛、黄芩素的含量测定,为小儿柴桂退热颗粒全面的质量控制提供科学依据。