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目的
采用光激化学发光分析(LICA)技术建立快速定量检测人高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的方法。
方法采用2株配对的HMGB1单克隆抗体(简称单抗)，1株单抗包被受体微球，另1株单抗先用生物素标记，再与链霉亲合素的供体微球共同组成人HMGB1的LICA检测方法，进而优化反应体系并对方法的各项性能指标进行评价。分别测定普通肺炎患者(35例)和重症肺炎患者(25例)血清HMGB1的浓度，并与健康体检者(35名)进行比较。
结果建立的HMGB1 LICA检测方法的灵敏度为0.1 μg/L，线性测量范围为0.1～1 000 μg/L；批内和批间精密度分别为1.74%～2.92%和1.93%～3.73%，均低于5%；回收率范围为94.53%～106.37%，平均回收率为99.74%；与酶联免疫吸附测定方法有良好的相关性(r＝0.888 2)；与HMGB2和HMGB3重组抗原无明显交叉反应，特异性良好。普通肺炎患者和重症肺炎患者血清HMGB1的质量浓度分别为(6.76±3.13)和(19.69±9.04) μg/L，均高于健康体检者[(1.49±0.74) μg/L；t值：－5.447和－5.186，均P<0.01]，普通和重症肺炎患者间差异亦有统计学意义(t＝－3.500，P<0.01)。
结论LICA法检测HMGB1灵敏度高、特异性强、结果可靠，且具有均相、快速、免清洗等特点，有良好的临床应用前景。