犬瘟热病毒N蛋白基因的克隆、原核表达及其表达产物抗原性鉴定

来源 :新疆农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：woshi52038

【摘要】

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参考GenBank中发表的CDVN蛋白基因序列，用Oligo6．0软件设计一对特异性引物，从患犬瘟热的犬全血样品中提取总RNA，经RT—PCR扩增得到1572bp的基因片段，将其插入pMD18-T克隆载体中构

【作者】

：

申卫红马素贞陈胜男刘腾飞陶玉成简子健

【机构】

：

新疆农业大学动物医学学院

【出处】

：

新疆农业大学学报

【发表日期】

：

2010年2期

【关键词】

：

犬瘟热病毒 N蛋白基因克隆原核表达抗原性 canine distemper virus CDV N protein gene cloning pro

【基金项目】

：

新疆维吾尔自治区高新技术项目（200611107）

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参考GenBank中发表的CDVN蛋白基因序列，用Oligo6．0软件设计一对特异性引物，从患犬瘟热的犬全血样品中提取总RNA，经RT—PCR扩增得到1572bp的基因片段，将其插入pMD18-T克隆载体中构建了pMD18-CDVN重组质粒，将其转入到大肠杆菌DH5a中，进行鉴定、测序。将目的基因与原核表达载体pGEX-4T-2连接构建了pGEX-4T-2-CDVN重组质粒，转化到大肠杆菌BL21（DE3）中，进行鉴定、测序、IPTG诱导表达。序列分析表明克隆的CDVN蛋白基因从起始密码子ATG开始到终止

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