【摘 要】
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目的构建能同时表达人和鼠可溶性VEGFR2的双基因真核表达载体,并初步验证其功能。方法分别以pORF-hVEGFR2和pORF-mVEGFR2为模板,通过PCR将人和鼠的sVEGFR2基因定向克隆入真核
【机 构】
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四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室,
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目的构建能同时表达人和鼠可溶性VEGFR2的双基因真核表达载体,并初步验证其功能。方法分别以pORF-hVEGFR2和pORF-mVEGFR2为模板,通过PCR将人和鼠的sVEGFR2基因定向克隆入真核细胞双顺反子载体pVITRO2的多克隆位点区,构建pVITRO2-hm-sVEGFR2双基因表达质粒。通过体外实验研究pVITRO2-hm-sVEGFR2的表达产物能否阻断VEGF对脐静脉血管内皮细胞的促增殖能力,体内实验建立小鼠B16肿瘤模型研究其抗肿瘤活性,CD31免疫组化染色检测其对肿瘤新生血管的抑制情况。结果 pVITRO2-hm-sVEGFR2双基因表达质粒成功构建,体外能阻断VEGF对血管内皮细胞的促增殖能力,能明显抑制肿瘤在小鼠体内的生长以及肿瘤组织内的新生血管生成,其抑制作用大于人或鼠可溶性VEGFR2单基因治疗方案。结论 pVITRO2-hm-sVEGFR2明显抑制新生血管生成活性,是一种新型的抗血管生成DNA疫苗,为抗肿瘤治疗研究提供了新的思路和方法。
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