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目的:构建人HCN4基因的真核表达质粒并转染人胚胎肾细胞,建立异源性表达HCN4通道模型。方法:通过聚合酶链反应扩增人HCN4基因全长核苷酸序列,双酶切( XhoI和EcoRI)后插入真核表达质粒pIRES2-EGFP中,构建重组真核表达质粒pIRES2-HCN4-EGFP。应用脂质体法将重组质粒pIRES2-HCN4-EGFP转染入HEK293细胞中进行表达。全细胞膜片钳技术检测HCN4通道电流。结果:酶切及测序的结果显示pIRES2-HCN4-EGFP构建成功,倒置荧光显微镜能观察到EGFP绿色荧光,