目的:对高效液相色谱法（HPLC）和超高效液相色谱法（UPLC）测定的南方红豆杉中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ（10-DABⅢ）含量进行比较。方法:分别建立HPLC和UPLC测定南方红豆杉中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ含量的方法。HPLC法为Inertsil ODS-SP（4.6×250 mm,5μm）色谱柱,以甲醇:水（53∶47）为流动相,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长227 nm,柱温30℃;UPLC法为ACQUITY UPLC BEH C₁₈（2.1×100 mm,1.7μm）色谱柱,以甲醇∶水（53∶47）为流动相,流速分别为0.3 mL·min^-1,检测波长227 nm,柱温15℃。结果:超高效液相色谱仅6.8 min即可完成测试,测定时间远低于高效液相色谱法,2种方法所得结果一致结论:UPLC法较HPLC法具有速度更快、灵敏度更高,且节省溶剂的优势。UPLC法可以成功代替HPLC法,应用于南方红豆杉药材的质量控制。