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目的：建立反相高效液相色谱法测定两性霉素B及其脂质体含量与相关物质。方法：采用YMC C18（150mm×4．6mm，5μm）色谱柱，流动相为甲醇-乙腈-2．5mmol·L^-1乙二胺四乙酸二钠溶液（41：18：41），柱温30℃，检测波长407砌，流速为1．0mL·min^-1。结果：两性霉素B及其杂质可完全分离；进样20止时，线性浓度范围为5～120μg·mL^-1（含量测定），0．2～10μg·mL^-1（相关物质检查）；最低检测限（LOD）为29．