转基因逆转椎间盘退变重组腺病毒载体Ad／CMV—hTGFβ1的构建

来源 :中国骨肿瘤骨病 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yu782072350

【摘要】

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目的构建一个高效的重组腺病毒载体Ad/CMV-hTGFβ1,用于进一步的基因转移逆转椎间盘退变的实验研究.方法应用一种新的重组腺病毒构建系统来构建腺病毒载体.首先将hTGFβ1的cD

【作者】

：

谭江威胡有谷郑洪军李书忠

【机构】

：

266003

【出处】

：

中国骨肿瘤骨病

【发表日期】

：

2003年2期

【关键词】

：

转基因逆转椎间盘退变重组腺病毒载体实验大肠杆菌重组穿梭质粒 Intervertebral dose Gene therapy Adenovirida

【基金项目】

：

山东省卫生厅资助项目

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目的构建一个高效的重组腺病毒载体Ad/CMV-hTGFβ1,用于进一步的基因转移逆转椎间盘退变的实验研究.方法应用一种新的重组腺病毒构建系统来构建腺病毒载体.首先将hTGFβ1的cD-NA亚克隆到穿梭质粒pShuttle-CMV上.重组穿梭质粒pShuttle-CMV-hTGFβ经PmeI酶切线性化后,与超螺旋的病毒质粒pAdEasy-1共转染大肠杆菌BJ5183.两种质粒在BJ5183中进行同源重组,重组病毒质粒pAd/CMV-hTGFβ1经卡那霉素平板筛选获得.经酶切分析鉴定后,重组病毒质粒用PacI

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