【摘 要】
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目的:在离体钙化的血管平滑肌细胞上,观察内皮素受体阻断剂对血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响,探讨内皮素(ET)促进细胞钙化的信号转导和分子机制.方法:磷酸甘油制备钙化VSMC
【机 构】
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郧阳医学院病理生理教研室,湖北,十堰,442000郧阳医学院机能实验室,湖北,十堰,442000;北京大学医学部生理与病理生理系,北京,100083;
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目的:在离体钙化的血管平滑肌细胞上,观察内皮素受体阻断剂对血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响,探讨内皮素(ET)促进细胞钙化的信号转导和分子机制.方法:磷酸甘油制备钙化VSMCs;通过细胞钙含量,[45Ca2+]摄取,碱性磷酸酶活性测定,判断钙化程度,[3H]-胸腺嘧啶([3H]-TdR)和[3H]-亮氨酸([3H]-Leu)掺人测定细胞DNA合成,竞争性定量RT-PCR测定VSMCs骨桥蛋白(OPN)mRNA水平,放射免疫法测定培养上清ET含量.结果:与正常对照VSMCs相比,钙化VSMCs内钙含量,[45ca2+]摄入及碱性磷酸酶活性分别增加119％、174％和7倍(P<0.01),OPN表达增加86％;细胞生长活跃,[3H]-TdR和[3H]-Leu分别增加7l％和35％;钙化细胞培养基中内皮素含量较对照组增加35％(P<0.05).而钙化加内皮素受体阻断剂BQl23组明显减轻VSMCs钙化程度,钙含量,[45ca2+]摄入及碱性磷酸酶活性分别较钙化组降低33％、37％、40％(均P<0.01).OPN表达明显下调25％;细胞增殖活性明显降低.结论:BQl23可减轻VSMCs钙化程度,表明ET促进VsMcs钙化主要是通过内皮素A型受体(ET-A)途经.
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