利用突变的绿色荧光蛋白基因为标记构建新型克隆载体

来源 :植物学报：英文版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yq_ma

【摘要】

：

将三位点替换突变的绿色荧光蛋白（ＧＦＰ－Ｓ６５Ｔ、Ｖ６８Ｌ、Ｓ７２Ａ）基因插入到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ（＋）的ＸｂａⅠ和ＳａｃⅠ之间，构建为新型的克隆载体ｐＧｒｅｅｎＬＤ。此质粒载体在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达后使菌落在日光下呈现黄绿色，而在长波紫外光照射下呈现亮绿荧光，当外

【作者】

：

董越梅李久蒂

【机构】

：

中国科学院植物研究所

【出处】

：

植物学报：英文版

【发表日期】

：

1999年5期

【关键词】

：

绿色荧光蛋白克隆载体构建 GFP Green fluorescent protein GFPmut2 pBluescript SK(+) Clonin

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将三位点替换突变的绿色荧光蛋白（ＧＦＰ－Ｓ６５Ｔ、Ｖ６８Ｌ、Ｓ７２Ａ）基因插入到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ（＋）的ＸｂａⅠ和ＳａｃⅠ之间，构建为新型的克隆载体ｐＧｒｅｅｎＬＤ。此质粒载体在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达后使菌落在日光下呈现黄绿色，而在长波紫外光照射下呈现亮绿荧光，当外源ＤＮＡ片段插入该载体的多克隆位点使ｇｆｐ基因表达受阻时，转化的Ｅ．ｃｏｌｉ菌落为白色。因此可以用Ｅ．ｃｏｌｉ菌落黄绿色／绿色

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