目的:建立同时测定百蕊颗粒中紫云英苷和山奈酚2种有效成分含量的HPLC-MS/MS检测方法。方法:采用Ultimate XB-C₁₈（100 mm×2.1 mm,5μm）色谱柱;流动相为0.1%甲酸水溶液（A）-0.1%甲酸乙腈（B）,梯度洗脱,流速0.3 ml·min^-1;柱温为40℃;采用电喷雾离子源（ESI）,以多反应监测方式（MRM）进行定量分析。紫云英苷和山奈酚在负离子模式下定量分析离子对分别为m/z 447.2→m/z 284.0和m/z 285.1→m/z 187.1。结果:紫云英苷和山奈酚的浓度分别在9.86¹ 970ng·ml^-1（r=0.999 5）和8.73⁴37 ng·ml^-1（r=0.999 6）范围内均呈良好线性关系;紫云英苷和山奈酚低、中、高平均加样回收率分别为99.23%、99.65%、99.23%和98.24%、99.13%、99.69%,RSD分别为1.84%、1.37%、1.21%和1.38%、0.96%、1.47%（n=6）。结论:本文方法简便可靠,重复性好,可同时测定百蕊颗粒中紫云英苷和山奈酚的含量,适用于百蕊颗粒质量控制。