【摘 要】
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目的 研究高效结肠癌富伴侣分子疫苗的制备及其抗癌治疗作用.方法 结肠癌CT26细胞在0.1 mg/L天花粉蛋白的培养基中不同温度下培养,诱导癌细胞伴侣分子的表达和抗原肽的合成.
【机 构】
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浙江中医药大学附属杭州市第三人民医院肛肠科,浙江大学免疫学研究所
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目的 研究高效结肠癌富伴侣分子疫苗的制备及其抗癌治疗作用.方法 结肠癌CT26细胞在0.1 mg/L天花粉蛋白的培养基中不同温度下培养,诱导癌细胞伴侣分子的表达和抗原肽的合成.超声裂解并离心,盐析法分离上清蛋白,低温透析去除相对分子质量低于50 000和高于300 000的蛋白分子.凝胶过滤结合变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)收取相对分子质量70 000、90 000、95 000、110 000和170 000处峰段蛋白.对所获蛋白定性定量,检测不同蛋白复合物的T细胞增殖、抗结肠癌自然杀伤细胞(NK)和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性等主要抗癌效应.结果 主要伴侣分子(HSP60、HSP70、HSP90、gp96、HSP110和HSP170)的抗原肽复合物被较好提取,制备了浓缩的富伴侣分子抗原肽.体外抗癌实验显示,相对于普通处理的瘤苗,各肠癌瘤苗的细胞增殖、NK和CTL细胞活性等主要抗癌效应均有明显提高(P
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