小鼠羊水来源干细胞原代培养及向神经元的诱导分化

来源 :中华生物医学工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuezhenlong0310
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目的 研究小鼠羊水来源干细胞(mAFSC)的原代培养及向神经元的诱导分化. 方法 机械手段抽取孕中期小鼠羊水,体外培养扩增,观察细胞生长特性;流式细胞仪检测mAPSC表面抗原表达;锥虫蓝检测P3、P8、P13代mAFSC细胞活性.体外用神经元诱导液诱导mAFSC分化为神经元,并用免疫荧光检测神经元特异性表面标志β-tubulin. 结果 原代mAFSC培养7~10 d可以贴壁生长至80%以上,细胞数达3.5×105~4.0×105个.经3次以上传代以后,mAFSC呈现较均一的梭形细胞,并呈栅栏样排列.mAFSC在体外活性及增殖能力较强,经90 d以上的体外培养,P17代的细胞才出现细胞形态变化及增殖能力明显下降.流式细胞仪检测结果显示,表面抗原Sca-1、CD29阳性;CD11b、CD34及CD45为阴性.mAFSC经神经元诱导液诱导3 d之后,可于体外形成神经样细胞,同时部分细胞表达β-tubulin. 结论 mAFSC在体外具有很好的活性及增殖能力,且拥有定向分化的潜能,为今后的小鼠动物实验细胞治疗研究提供了一种新的干细胞.
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