【摘 要】
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目的 探讨天麻对脑缺血后星形胶质细胞损伤是否具有直接保护作用及Cathepsin B-Caspase信号通路与天麻保护细胞的作用有无关联。方法 建立动物缺血性脑中风模型,缺血再灌注28 d,随机分为假手术组、模型组、天麻低剂量(50 mg/kg)组、天麻中剂量(100 mg/kg)组、天麻高剂量(150 mg/kg)组,天麻各剂量组每天给予不同剂量的天麻,假手术组给予同体积的溶剂,28 d后观察各
【基金项目】
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启东市社会发展科技创新项目,编号:启科发[2015]1号-3-13;
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目的 探讨天麻对脑缺血后星形胶质细胞损伤是否具有直接保护作用及Cathepsin B-Caspase信号通路与天麻保护细胞的作用有无关联。方法 建立动物缺血性脑中风模型,缺血再灌注28 d,随机分为假手术组、模型组、天麻低剂量(50 mg/kg)组、天麻中剂量(100 mg/kg)组、天麻高剂量(150 mg/kg)组,天麻各剂量组每天给予不同剂量的天麻,假手术组给予同体积的溶剂,28 d后观察各组大鼠行为学、神经症状以及脑梗死体积。通过培养原代大鼠大脑皮层星形胶质细胞,然后进行氧糖剥夺再灌注(OGD/R),建立体外的细胞模型,缺氧缺糖再灌注导致的星形胶质细胞损伤,使用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测,采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测星胶标志蛋白胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及凋亡蛋白Cathepsin B、Caspase-3表达。结果 天麻低、中、高剂量组脑梗死体积较模型组明显缩小(P<0.01)。Western Blot检测结果显示:缺血再灌注后,大鼠的皮层缺血区星形胶质细胞标志蛋白GFAP表达下调(P<0.01),通路相关蛋白Cathepsin B、Caspase-3表达上调(P<0.01)。给予天麻干预之后,与模型组相比,天麻各剂量组GFAP表达升高,且缺血区Cathepsin B、Caspase-3表达明显降低(P<0.05或P<0.01)。LDH检测结果显示:随着天麻(0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L)给药剂量的增加,星形胶质细胞得以不同程度的保护(P<0.05或P<0.01)。体外Western Blot检测结果显示:天麻(0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L)可有效地降低OGD/R处理的星形胶质细胞中或Cathepsin B、Caspase-3的表达(P<0.05或P<0.01)。结论 天麻可通过Cathepsin B-caspase的细胞凋亡途径进而对缺血再灌注引起的细胞损伤发挥保护作用。
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