【摘 要】
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目的 建立铝吸附甲型肝炎(甲肝)灭活疫苗中甲肝病毒(HAV)抗原的解离方法.方法 选择20%二乙醇胺1.25 mL、10%Triton X-100 0.2 mL和PBS 8.55 mL混合液作为解离液A;pH7.2的3%(w/v)柠檬酸缓冲液作为解离液B;20%(w/v)柠檬酸三钠为解离液C.分别检测3种解离液在不同的解离条件下对铝佐剂甲型肝炎灭活疫苗的解离情况,用ELISA法检测解离后的HAV抗
【机 构】
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310013杭州,浙江省医学科学院病毒病研究所,310013杭州,浙江省医学科学院病毒病研究所,310013杭州,浙江省医学科学院病毒病研究所
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目的 建立铝吸附甲型肝炎(甲肝)灭活疫苗中甲肝病毒(HAV)抗原的解离方法.方法 选择20%二乙醇胺1.25 mL、10%Triton X-100 0.2 mL和PBS 8.55 mL混合液作为解离液A;pH7.2的3%(w/v)柠檬酸缓冲液作为解离液B;20%(w/v)柠檬酸三钠为解离液C.分别检测3种解离液在不同的解离条件下对铝佐剂甲型肝炎灭活疫苗的解离情况,用ELISA法检测解离后的HAV抗原含量,计算抗原回收率,确定最佳解离液及解离条件,并验证其可重复性.结果 3种解离液HAV抗原解离试验显示,解离液C在室温(20~28℃)条件下解离1h,HAV抗原的回收率最高,可达95%及以上,重复试验的变异系数均<10%.结论 20% (w/v)柠檬酸三钠可作为铝佐剂甲肝灭活疫苗的首选抗原解离剂,该解离剂配方简单,操作简便,结果重复性好,准确度高。
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