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目的:克隆小鼠甲胎蛋白(AFP)基因并进行表达鉴定,构建小鼠AFP真核表达载体并建立稳定表达甲胎蛋白的小鼠肿瘤细胞株.方法:从HePal-6细胞中提取总RNA进行RT—PCR,克隆出小鼠AFP基因,亚克隆于pcDNA3.1中构建真核表达载体6pmAFP,进行酶切、测序和表达鉴定,pmAFP稳定转染EL-4细胞建立EL-4(mAFP)细胞株,RT-PCR检测EL-4(mAFP)细胞mAFP mRNA的表达,Western blot检测mAFP蛋白表达,将EL-4(mAFP)细胞种植于6只小鼠背部皮下观察成瘤