韭葱黄条病毒六安分离物CP基因原核表达与抗体制备

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根据已报道的韭葱黄条病毒(LYSV)序列设计引物,扩增LYSV六安分离物的外壳蛋白(CP)基因,序列同源性分析结果表明,与目前已报道的LYSV不同分离物CP基因核苷酸序列同源性为84.0%~95.8%,相应推测出的氨基酸序列同源性为86.8%~97.6%。将CP基因插入原核表达载体pSBET后在大肠杆菌BL21(DE3)Plys S中诱导表达。通过12%SDS—PAGE和5%~20%梯度SDS—PAGE两次制备电泳纯化诱导产物,免疫家兔获得抗CP血清,Western blot分析对CP具有高度特异性。硫酸
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