【摘 要】
：
目的 构建携带融合型microRNA(微小RNA)基因miR-335的荧光真核表达质粒pEGFP-C1-miR-335,并观察其在乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达.为研究小RNA基因表达调控机制建立实验基础
论文部分内容阅读
目的 构建携带融合型microRNA(微小RNA)基因miR-335的荧光真核表达质粒pEGFP-C1-miR-335,并观察其在乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达.为研究小RNA基因表达调控机制建立实验基础. 方法 应用基因重组技术,从人类基因组DNA中扩增miR-335的前体序列,经PCR引物加入酶切位点, 酶切后插入荧光真核表达载体pEGFP-C1, 构建miR9真核表达载体pEGFP-C1-miR-335, 然后进行酶切和测序鉴定重组质粒的正确性.应用脂质体介导的转染技术将该质粒导入MDA-MB-231细胞,24 h后观察荧光蛋白表达情况,用Northern blot方法检测miR-335表达. 结果 酶切和测序鉴定证实插入miR-335前体片段序列正确.细胞转染24 h后,荧光显微镜下观察到GFP表达,60%左右转染细胞发出荧光.Northern blot检测到miR-335表达. 结论 成功构建pEGFP-C1-miR-335荧光真核表达载体,并可在乳腺癌细胞中有效表达.
其他文献
由于没有足够的资产供应,明年资产荒可能更严重;更坏的是,为抑制实际利率的上升,整个市场会被淹没,明年的10年期国债利率约在2.5％.rn由于没有足够的资产供应,明年资产荒可能更
顶岗实习是高职院校学生重要的教学环节之一。本文通过我校学生顶岗实习过程中的管理制度和体会,探讨了顶岗实习过程中学生自我管理制度的构建框架,旨在激发学生的自我管理,
造林活动可以确保经济以及社会等的可持续的发展。然而在造林后需要进行适当的养护活动，本文重点的介绍了林业更新造林的具体措施。
采购管理是石油工程承包项目中的一个重要组成部分,采购的合理性、科学性对于整个项目的进度、成本、质量均有深远的影响。基于集约化的优势展开项目采购可以实现工作效率提
进入大数据时代之后,财会行业受到了极大的影响,财会行业的发展既面临着巨大的机遇,但随之而来的也有很多的挑战.本文旨在通过分析大数据和财会行业的关联,为行业的发展提出
目的:通过对人性化护理在血液净化中的应用情况进行观察,分析人性化护理在血液净化中的应用效果.方法:随机选择 2018 年 1 月至 2018 年 12 月在我院接受血液净化治疗的 76
今期向大家介绍的是一只变身股——台和商事(01037.HK).这只股票本业是经营电子产品制造、个人计算机产品经销及电子元器件经销业务.rn卖盘后股权更集中rn集团于2012年进行了
如今，市场经济迅猛发展，发展中的企业的管理创新突显其重要性，同时，其意义非凡。企业要提高核心竞争力，使其自身可持续发展，势必离不开企业管理创新，培养、加强企业的管理创新能力对
目的:通过选取我院临床的患者数据,进而来探讨并且分析护理干预在老年高血压肾病患者临床护理中的应用价值.方法:从在本院医治的老年高血压患者并且医治的时间在2018 年 1 月
网络信息社会下开放性和时效性的中职德育环境,给中职德育工作者带来了挑战和机遇。本文分析了中职德育教育的突出特点,结合本人教学探讨了实现这些特点的有效途径。
The op