表达绿色荧光蛋白的鸭肠炎病毒gE基因转移载体构建

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本实验利用PCR方法扩增DEVC-KCE株gE基因片段(包含gI基因及其侧翼序列),扩增产物克隆入pGEM—T载体测序后亚克隆至pUC19EcoRI、SalI位点间,获得pUC—gE。将增强型绿色荧光蛋白表达盒插入pUC-gEBamHI位点,构建转移载体pUC-gE-EGFP。该转移载体有7个单一酶切位点可供外源基因插入,上下游侧翼分别为1.57Kb和1Kb。将转移载体pUC—gE—EGFP转染鸭胚成纤维细胞(DEF),观察到绿色荧光,说明EGFP基因获得有效表达,为开发以鸭肠炎病毒为载体的多价、多联基因
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