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建立了测定痕量大观霉素的共振瑞利散射（RRS）法。在弱碱性Tris-HCl缓冲介质中,大观霉素与橙黄Ⅳ相互作用后,共振瑞利散射显著增强,在352nm处的△IRRS最强。大观霉素的质量浓度在0.6～4.0mg/L范围内与△IRRS成正比,检出限（3Sb/S）为0.084mg/L。该法可用于市售大观霉素药物及人尿中大观霉素含量的测定,回收率为98.6%～101.5%。