胎盘源性间充质干细胞多药耐药基因的转染与鉴定

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目的 探讨重组逆转录病毒载体介导mdr1基因转染胎盘源性间充质干细胞(P-MSC)以应用于基因治疗的可行性、安全性.方法 Percoll密度梯度离心法自人胎盘组织中分离培养间充质干细胞(MSC),利用重复感染方法将含有mdr1基因的逆转录病毒载体导入P-MSC,经逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测mdr1 mRNA表达,荧光细胞分选法(FAGS)检测目的基因表达,同时对mdr1-MSC的干细胞特性进行鉴定及分析.结果 转染细胞中显示mdrl mRNA表达;转染P-MSC表达P-gp的阳性细胞百分率为(27.6±5.1)%,明显高于非转染组的(0.4±0.1)%,两组比较差异有统计学意义(t=14.291,P<0.01);转染MSC在G0/G1期所占比例为95.40%,符合干细胞增殖特点.超微结构揭示其具有典型的低分化干细胞超微结构特点,且在特异诱导条件下具有向成脂、成骨定向分化潜能.结论 由重组逆转录病毒介导mdr1基因体外转染胎盘源性MSC可获得高效的P-gp表达,且转染细胞可依然保持其干细胞特性。

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