比率检测高/半胱氨酸荧光染料的合成及活细胞成像研究

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经一步简单反应获得了一例长波长尼罗蓝衍生物荧光染料RB-S.该染料分子RB-S对高/半胱氨酸具有明显的荧光响应,且随着高/半胱氨酸浓度(0.03~0.33 μmol/L)逐渐增加,染料荧光强度在685 nm处减弱,相应地在755 nm处增强,在685与755 nm处的荧光变化具有良好线性关系的比率荧光变化.通过高效液相色谱-质谱联用技术以及核磁滴定氢谱研究了染料分子检测高/半胱氨酸的机理.试验结果表明:染料分子中的醛基与高/半胱氨酸发生成环反应生成噻唑烷.在体外溶液测试中(pH=7.4),染料分子RB-S对高/半胱氨酸的检出限为0.025 μmol/L,且不存在其他物质干扰,成功用于血清样品中内高/半胱氨酸荧光比率检测.染料分子RB-S具有良好的活细胞膜通透性,使其能够对活细胞内高/半胱氨酸荧光比率成像.
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