【摘 要】
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乳酸脱氢酶(LDH)是乳酸生成途径中的关键酶,敲除乳酸脱氢酶基因,理论上可以减少甚至消除乳酸的产生,提高2,3-丁二醇的产量和得率。该研究采用体外拼接方式构建乳酸脱氢酶基因
【机 构】
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右江民族医学院科学实验中心,黑龙江大学生命科学学院微生物黑龙江省高校重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31570492),黑龙江省教育厅重点项目(HDJCCX-2016Z05),广西自然科学基金(2017GXNSFAA198101),广西高校中青年教师基础能力提升项目(2019KY0580,2020KY13007)
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乳酸脱氢酶(LDH)是乳酸生成途径中的关键酶,敲除乳酸脱氢酶基因,理论上可以减少甚至消除乳酸的产生,提高2,3-丁二醇的产量和得率。该研究采用体外拼接方式构建乳酸脱氢酶基因的同源线性片段ldhL-Cmr-ldhR,将其电转化至Klebisella oxytoca HD79中,通过Red同源重组技术筛选敲除成功的重组菌株,经聚合酶链式反应(PCR)、荧光定量-聚合酶链式反应(FQ-PCR)及2,3-丁二醇产量检测验证。结果表明,重组菌株2,3-丁二醇产量为40.20 g/L、转化率为0.38 g/g和生产强
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