【摘 要】
：
目的 为了提高对自噬小体示踪的精确度和清晰度,全面展示细胞自噬相关进程,优化基于绿色荧光蛋白-微管相关蛋白1轻链3β（GFP-LC3β）标记物的自噬小体示踪方法。方法 组织块贴壁
【机 构】
：
东华大学环境科学与工程学院,东华大学学化工与生物工程学院
【基金项目】
：
国家自然基金（#31371257）, 上海市科委重点项目（#14140900502）, 东华大学研究生创新基金（DHD2014049）
论文部分内容阅读
目的 为了提高对自噬小体示踪的精确度和清晰度,全面展示细胞自噬相关进程,优化基于绿色荧光蛋白-微管相关蛋白1轻链3β（GFP-LC3β）标记物的自噬小体示踪方法。方法 组织块贴壁法原代培养小鼠耳成纤维细胞,脂质体转染过表达GFP-LC3β;GFP-LC3β充分表达后给予药物刺激以激活或阻断细胞自噬通路,然后进行免疫荧光染色。对染色操作进行优化：首先,延长多聚甲醛的固定细胞时间（从15min延长至45min）;其次,提高Triton X-100处理时间,除第一次和最后一次使用PBS润洗,其余每一次使用的PB
其他文献
组织学与胚胎学是医学、动物医学、动物科学等专业本科生的一门专业基础课程,其内容涉及许多人名类名词。在教学中,如能适当介绍其来龙去脉,引入相关科技史,对提升课堂教学的
目的建立和评价幽门螺杆菌(H.pylori)感染的2种细胞感染模型,为进一步研究H.pylori感染及其相关机制奠定基础。方法培养人胃癌细胞株MKN45细胞,与H.pylori共孵育6h、12h和24h
目的探讨潜伏膜蛋白2A（1atent membrane protein 2A，LMP2A）、Snail和N-cadherin在鼻咽癌（nasopharyn-geal carcinoma，NPC）中的表达及意义。方法通过免疫组织化学检测LMP2A、Snail和
目的 探讨胃癌组织中DLC-1和ezrin表达水平与胃癌转移或复发的关系。方法 选择2005年9月至2010年12月行胃癌根治术并经病理确诊的患者160例。应用SP法检测DLC-1和ezrin在胃癌
目的探讨激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisomeproliferator-activatedreceptorγ，PPARγ）对异烟肼与利福平合用致肝损伤的作用。方法以异烟肼和利福平合用制作大鼠肝损
目的研究半滑舌鳎肝胰、中肾、鳃、头肾、脾和心中酸性磷酸酶（ACP）、碱性磷酸酶（ALP）和过氧化物酶（POX）的分布及组织定位。方法取健康半滑舌鳎肝胰、中肾、鳃、头肾、脾和心组织进
目的探讨使用基于数字化切片的虚拟实验教学对组织胚胎学实验课的教学效果及提升学生学习成绩的影响。方法以新疆医科大学2017级护理本科专业学生为研究对象,对照班级采用数
目的了解caspase-9在胃间质瘤中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用实时荧光定量PCR技术检测108例胃间质瘤患者的肿瘤组织和胃壁正常组织中caspase-9mRNA的表达；免疫组
目的了解抑癌基因Keap1对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖能力的影响。方法用携带EGFP-Keap1慢病毒感染NSCLC细胞系A549细胞,以空载EGFP慢病毒感染
目的探讨睡眠剥夺（sleep deprivation,SD）对小鼠肝脏形态、功能的影响及肿瘤坏死因子α（tumor necrosisfactor,TNF-α）表达的意义。方法C57雄性小鼠随机分为正常对照组、睡眠剥夺