人Sox2基因的克隆表达和纯化

来源 :华中师范大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：jiacktalk

【摘要】

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应用RT-PCR方法从人胚胎干细胞中扩增出Sox2基因,构建pET28b-Sox2表达载体.用IPTG诱导转化pET28b-Sox2表达载体的大肠杆菌BL21(DE3),并优化表达条件为37℃IPTG0.8 mmol/L诱导

【作者】

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张琦忻珍桦蔡引凤高云霞沙红英刘思国陈

【机构】

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同济大学生命科学与技术学院; 上海转基因研究中心; 同济大学生命科学与技术学院上海200300; 上海201203; 上海200300; 复旦大学华

【出处】

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华中师范大学学报(自然科学版)

【发表日期】

：

2008年01期

【关键词】

：

Sox2 原核表达纯化复性

【基金项目】

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国家863计划项目(2006AA02A102);上海市科技攻关项目(06dj14001)

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应用RT-PCR方法从人胚胎干细胞中扩增出Sox2基因,构建pET28b-Sox2表达载体.用IPTG诱导转化pET28b-Sox2表达载体的大肠杆菌BL21(DE3),并优化表达条件为37℃IPTG0.8 mmol/L诱导4 h.以Ni-NTA亲和层析法纯化Sox2重组蛋白,对变性蛋白进行柱上和透析复性,复性后蛋白得率为0.7 mg/g湿菌重.

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