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目的探讨Rouviere’s沟解剖定位及其延长线为肝外胆管参照线在腹腔胆囊切除术中的应用。方法自2011年10月至2016年10月实施腹腔镜胆囊切除术500例，术中采用Rouviere’s沟解剖定位为导航原则的胆囊三角区解剖技巧。结果500例中，除2例中转开腹外，均在以RouViere’s沟及其延长线为肝外胆管安全标志参照线下成功实施腹腔镜胆囊切除术，并无一例发生胆管损伤及手术死亡。结论以RouViere’s沟作为解剖定位及其延长线为肝外胆管参照线平面上实施的胆囊切除术是安全的，值得推广应用。