【摘 要】
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目的 通过多个基因簇变异株联合免疫的方式制备抗G Ⅱ.4型诺如病毒(NoV)P结构域单克隆抗体(mAb).方法 用复合抗原G Ⅱ.4型NoV/1996(VA387)、2004、2006b和2010基因簇P颗粒免
【机 构】
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南方医科大学公共卫生学院流行病学系,广东广州510515南方医科大学中医药学院中西医结合基础教研室,广东广州510515;
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目的 通过多个基因簇变异株联合免疫的方式制备抗G Ⅱ.4型诺如病毒(NoV)P结构域单克隆抗体(mAb).方法 用复合抗原G Ⅱ.4型NoV/1996(VA387)、2004、2006b和2010基因簇P颗粒免疫BALB/c小鼠,将成功免疫的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,通过ELISA筛选出阳性杂交瘤细胞,采用有限稀释法制备mAb并进行纯化,ELISA检测mAb效价和特异性,亚类试剂盒鉴定抗体亚类,NoV P颗粒-HBGA结合阻断实验检测mAb中和能力.结果 筛选出13株稳定分泌抗GⅡ.4型NoV P颗粒mAb的杂交瘤细胞株,纯化后的13株mAb效价均在10-4以上,属于IgG1型,且均与不同G Ⅱ.4型NoV变异株具有结合能力;其中5株mAb与G Ⅱ.17、G Ⅱ.3和G Ⅱ.6型NoV具有结合能力,3株mAb与G Ⅱ.2型NoV具有结合能力且具有人类组织血型抗原(HBGA)受体阻断能力.结论 通过NoV多个基因簇变异株联合免疫,成功制备出抗G Ⅱ.4型NoV P结构域的mAb,为基于P颗粒的G Ⅱ.4型NoV诊断、疫苗及抗体药物的研发奠定了基础.
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