【摘 要】
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目的验证血红素加氧酶-1(HO-1)中的第39位赖氨酸(K39)对电子传递的影响.方法通过定点诱变将K39置换为酸性氨基酸谷氨酸(E),并将得到的变异型酶基因克隆到高度表达的载体上表
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目的验证血红素加氧酶-1(HO-1)中的第39位赖氨酸(K39)对电子传递的影响.方法通过定点诱变将K39置换为酸性氨基酸谷氨酸(E),并将得到的变异型酶基因克隆到高度表达的载体上表达,提纯变异型HO,测定其活性,比较变异型酶与野生型酶的活性区别,以了解高保守的碱性氨基酸K39对电子传递的影响.结果 HO催化血红素的体外反应,由抗坏血酸提供电子时,变异型酶K39E与野生型酶比较活性没有显著性差异;而HO催化血红素的模拟体内反应,由NADPH- 细胞色素P450还原酶提供电子时,变异型酶K39E与野生型酶相比活性有显著性差异.结论 HO的碱性氨基酸K39在接受并传递NADPH-细胞色素P450所提供的电子时具有重要作用.
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