论文部分内容阅读
目的
观察在巨噬细胞(Mφ)-胶质瘤干细胞(GSCs)双色荧光示踪体外共培养模型中，二者间的相互作用，以多指标验证融合细胞的存在及其生物学特性，并分析相关分子机制。
方法将红色荧光蛋白基因稳定转染的人GSCs细胞株SU4-RFP，与源于绿色荧光蛋白(EGFP)Balb/c裸小鼠的Mφ体外共培养，细胞工作站下观察SU4-RFP与Mφ间的包括融合在内的多种相互作用，克隆高增殖力RFP/EGFP双阳性细胞，以免疫印迹、荧光探针原位杂交(FISH)、免疫细胞化学染色和染色体核型分析多指标鉴定融合细胞，命名为Mφ与GSCs的融合细胞(F-Mφ)，分析其生物学特性及相关分子机制。
结果体外共培养发现高增殖力EGFP/RFP双阳性细胞存在，单克隆并连续传代后在转录、翻译及荧光蛋白表达水平均证实RFP和EGFP共表达。融合细胞共表达Mφ标志物CD68和GSCs标志物Nestin，兼具两种细胞特征性染色体，证实其源于SU4-RFP与Mφ的自发融合。融合细胞的增殖速度、侵袭能力均高于SU4-RFP。融合细胞转染miR-146b-5p后，STAT3表达下降，凋亡率上升(18.83%)，而致瘤率(4/5)及肿瘤体积(9.7 mm±1.6 mm)均下降。
结论Mφ可与GSCs自发融合，融合细胞转化后恶性程度更高，与miR-146b-5p下调介导STAT3通路激活相关。