【摘 要】
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为了深入了解培养体系中二氧化碳分压(pCO2)和渗透压对中国仓鼠卵巢(CHO)细胞产物表达的影响。考察了不同pCO2和渗透压条件下CHO细胞的密度维持、代谢、产物表达量和产品质量(糖型
【机 构】
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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海倍谙基生物科技有限公司
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(21106045);国家重大专项(2013ZX10004003-003-003)
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为了深入了解培养体系中二氧化碳分压(pCO2)和渗透压对中国仓鼠卵巢(CHO)细胞产物表达的影响。考察了不同pCO2和渗透压条件下CHO细胞的密度维持、代谢、产物表达量和产品质量(糖型修饰和电荷异质化)的情况。pCO2和渗透压升高均对最终抗体表达产生不利的影响,其中渗透压升高对细胞后期活性维持不利,而pCO2升高则对产物表达期抗体比生成速率产生负面影响。通过对过程中胞内外代谢物的研究,发现pCO2和渗透压升高均会降低碳源有效利用率。在产物的质量方面,当渗透压升高时,产物的糖基化水平下降,产物电荷分析中的中性电荷含量比例升高;而当pCO2升高时,产物的糖型分布无明显变化,但其中中性电荷抗体含量降低。产物表达期的pCO2和渗透压的升高对细胞维持、物质能量代谢及产物表达存在诸多不利影响,因此应尽量避免培养体系中的CO2累积和渗透压升高的情况发生,以确保培养规模放大的正常进行。
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