miR-378a-3p靶向PKM2基因对食管鳞癌细胞Eca-109凋亡及能量代谢的影响

来源 :山西医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chaska
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目的 探讨微小RNA-378a-3p(miR-378a-3p)与PKM2基因的关系,以及miR-378a-3p对食管鳞癌细胞Eca-109凋亡及能量代谢的影响. 方法 采用Eca-109细胞系,后续实验分为空白对照组、阴性对照组(转染 negative control)和实验组(miR-378a-3p基因转染24 h与48 h).利用流式细胞技术检测miR-378a-3p转染后24 h和48 h对Eca-109细胞凋亡的影响;用紫外分光光度法检测miR-378a-3p转染后24 h和48 h对Eca-109细胞能量代谢的影响;用蛋白免疫印迹法(Western blot-ting)检测miR-378a-3p干预后PKM2蛋白水平的变化. 结果 与空白对照组和阴性对照组相比,实验组miR-378a-3p转染24 h和48 h时PKM2蛋白的表达水平降低(P<0. 05),且48 h较24 h时PKM2蛋白的表达水平降低更明显.与空白对照组和阴性对照组相比,实验组转染miR-378a-3p后24 h和48 h,紫外分光光度法检测ATP含量明显降低(P<0. 01),代谢减少,且48 h较24 h的ATP产量降低更明显.与空白对照组和阴性对照组相比,实验组miR-378a-3p转染后24 h和48 h Eca-109细胞的凋亡率显著增高(P<0. 001),48 h较24 h时细胞凋亡率增高更明显. 结论 miR-378a-3p通过抑制有氧酵解关键酶PKM2来干预食管癌细胞的能量代谢,进而增加细胞的凋亡.
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