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目的：构建ret基因真核表达载体pcDNA3．0-RET，为制作转基因动物提供实验基础。方法：利用HandⅢ及Not Ⅰ限制性核酸内切酶，消化pSK—RET及pcDNA3．0空质粒，获得目的基因及相应载体；通过T4连接酶重组DNA；通过氨苄青霉素（Amp）抗性、酶切鉴定及DNA序列分析，确定阳性克隆。通过脂质体包裹转染NIH3T3细胞，采用Western blot方法检测载体的瞬时表达状况。结果：Amp抗性筛选阳性；酶切片段电泳分析在5400bp及3300bp处有明显条带；DNA序列分析提示重组基因与实际