【摘 要】
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为研究外膜孔蛋白OmpD在肠炎沙门菌致病中的作用,本研究利用 λ-Red同源重组技术构建了肠炎沙门菌(C50336)ompD基因缺失突变株(C50336ΔompD).测定了C50336,缺失株C50336Δom
【机 构】
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河北科技师范学院,河北 秦皇岛,066004秦皇岛第二医院,河北 昌黎,066600;扬州大学,江苏 扬州,225009;
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为研究外膜孔蛋白OmpD在肠炎沙门菌致病中的作用,本研究利用 λ-Red同源重组技术构建了肠炎沙门菌(C50336)ompD基因缺失突变株(C50336ΔompD).测定了C50336,缺失株C50336ΔompD,回补株pBR322-ompD/C50336ΔompD各菌株在LB和M9培养基中的生长情况,结果显示,缺失株C50336ΔompD与野生型菌株和回补菌株相比,其生长速度无明显差异.利用结晶紫染色方法观察和测定生物被膜(BF)表达量,结果显示,C50336ΔompD与野生型菌株和回补菌株相比,其BF形成受到明显抑制;利用刚果红培养基和荧光剂培养基分析细菌BF成分变化,结果显示C50336ΔompD构成BF的主要成分卷毛和纤维素的表达量明显减少.通过K-B药敏试验结果显示,C50336ΔompD菌株与野生型菌株和回补菌株相比,其对包括多黏菌素B在内的多种抗生素的敏感性显著增强.利用小鼠模型评估ompD基因缺失对肠炎沙门菌致病力的影响,结果显示,ompD基因缺失突变株对小鼠的LD50相较野生菌株提高约20倍,表明OmpD蛋白与肠炎沙门菌致病力密切相关,毒力基因检测结果显示缺失株BF调控基因均转录水平下调.本研究为进一步阐释肠炎沙门菌致病机制奠定基础.
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