八字地老虎β-N-乙酰葡萄糖胺糖苷酶基因cDNA序列的克隆及原核表达研究

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[目的]克隆八字地老虎卢N乙酰葡萄糖胺糖苷酶基因的cDNA序列并进行原核表达。[方法]以八字地老虎预蛹期幼虫为材料提取总RNA,利用RT-PCR和RACE技术克隆基因cDNA序列,将cDNA序列编码区连接到原核表达载体pET21b并转化BL21进行原核表达,并使用Histag纯化试剂盒将目的蛋白进行纯化。[结果]得到cDNA全长序列,含有2488个碱基,包括一个1785个碱基的开放阅读框,编码一个含594个氨基酸的蛋白,分子量为67.8ku,等电点5.38,该序列登录GenBank并获得登录号FJ8487
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