转人乳铁蛋白cDNA山羊胎儿成纤维细胞系的建立

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：bjl123456

【摘要】

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采用RT—PCR获得人乳铁蛋白cDNA，通过LongandAcutePCR扩增山羊（Capra hircus）β-酪蛋白5′端6．5kb的调控序列，以pEGFP—C1为骨架构建乳腺特异性表达载体p6．5hLF—EGFP。脂质体介导

【作者】

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林慧赵明涛张玉玲刘风军王国华张涌

【机构】

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西北农林科技大学生物工程研究所、农业部家畜生殖内分泌与胚胎工程重点开放实验室

【出处】

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农业生物技术学报

【发表日期】

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2008年3期

【关键词】

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人乳铁蛋白山羊β-酪蛋白 EGFP报告基因供体细胞核移植 human lactoferrin caprine β-casein EGFP report

【基金项目】

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国家高技术研究与发展计划（863）项目（No.2004AA213072）资助.

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采用RT—PCR获得人乳铁蛋白cDNA，通过LongandAcutePCR扩增山羊（Capra hircus）β-酪蛋白5′端6．5kb的调控序列，以pEGFP—C1为骨架构建乳腺特异性表达载体p6．5hLF—EGFP。脂质体介导法转染山羊胎儿成纤维细胞，G418抗性筛选3-4周后，经PCR扩增和报告基因EGFP表达检测，得到稳定整合外源基因的转基因供体细胞系；同时在稳定转染p6．5hLF-EGFP的乳腺上皮细胞系的上清中检测到重组人乳铁蛋白的组织特异性表达。这为制备高效表达人乳铁蛋白的转基因山羊乳腺生物

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