Ⅰ型流感病毒核蛋白(NP)基因在大肠杆菌中的表达与鉴定

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目的:以Ⅰ型流感病毒RNA为模板扩增NP全基因cDNA,并在大肠杆菌中进行表达与鉴定。方法:提取流感病毒RNA,以RT—PCR法扩增编码NP基因cDNA。将扩增所得NP基因克隆于pMD18-T载体,然后定向亚克隆NP基因于原核表达载体pET-28a的多克隆位点中,经酶切鉴定后,将含有NP基因的重组质粒命名为pET-NP。用pET-NP转化受体菌BL21,在大肠杆菌BL21中表达,用诱导剂IPTG以不同浓度进行诱导,并在不同诱导时间收集样品,用SDS-PAGE和Western blot检测表达产物。结果:经
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