microRNA-202激活JNK/SAPK信号通路增强多发性骨髓瘤细胞药物敏感性的研究

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目的

研究microRNA-202 (miR-202)对多发性骨髓瘤(MM)细胞生长的影响,并初步探讨miR-202在MM细胞药物敏感性中的作用机制。

方法

荧光定量PCR检测miR-202及其靶基因B淋巴细胞刺激因子(BAFF)在MM细胞中的表达水平。将miR-202模拟物、miR-202抑制物、BAFF干扰质粒(siBAFF )及其阴性对照转染U266细胞,Western blot检测Bcl-2家族和MAPK信号通路蛋白的表达。WST-1法、流式细胞术(Annexin V-FLUOS )分别检测转染后U266细胞的增殖和凋亡情况。

结果

U266细胞、MM患者CD138+细胞中miR-202 mRNA表达(分别为0.052±0.009、0.304±0.354)均低于健康对照组(3.550±1.126)(P<0.001 ,P=0.009),BAFF表达水平(5.700±0.734、9.576±2.887)均高于健康对照组(1.819±0.853)(P<0.001,P=0.006)。miR-202模拟物转染组细胞增殖抑制率高于对照组[(56.04±0.02)%对(18.89±0.32)%,P=0.002]。Western blot结果显示,转染miR-202模拟物后,U266细胞Bcl-2表达下调约24%,而Bax蛋白的表达上调约1.24倍,miR-202模拟物组细胞凋亡率高于对照组[(49.60 ± 4.89)%对(26.20 ± 1.28)%,P=0.029]。硼替佐米和miR-202模拟物联合组细胞凋亡率为(51.23 ± 5.41)%,高于硼替佐米单独处理组(31.70 ± 4.40)%和硼替佐米与模拟物对照联合处理组[(51.23±5.41)%对(31.70±4.40)%,P=0.047;(51.23±5.41)%对(27.94±4.04)%,P=0.028)],而miR-202模拟物联合沙利度胺和地塞米松与miR-202模拟物对照组相比差异无统计学意义[(11.66±1.91)%对(10.63±1.74)%,P=0.700;(16.35±1.32)%对(17.43±1.95)%,P=0.400]。miR-202模拟物联合硼替佐米对U266细胞的增殖抑制率高于硼替佐米单独处理组[(36.93±5.98)%对(18.18±4.10)%,P=0.029]。miR-202模拟物及硼替佐米处理U266细胞后,p-JNK蛋白表达水平下调。

结论

miR-202模拟物和硼替佐米可协同抑制MM细胞增殖、诱导其凋亡,可能通过miR-202负向调控靶基因BAFF的表达、抑制JNK/SAPK信号通路的活化来实现的。

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