论文部分内容阅读
目的：克隆人抑瘤素（hOSM）基因并构建真核表达载体，在COS-7细胞中表达具有抑制人A375黑色素瘤细胞生长的基因重组蛋白。方法：用PMA刺激U937细胞，抽提总RNA，经RT-PCR获得cDNA，与pUCmT载体连接，经PCR获得全长hOSM基因，再与pcDNA3．1／mye-his（-）A真核表达载体连接，构建真核表达重组质粒pcDNA3．1A-hOSM，经PCR和限制性酶切及DNA测序鉴定后，在COS-7细胞中进行瞬时表达，采用RT-PCR鉴定hOSM基因的转录，MTT法检测表达产物抑制A375细