【摘 要】
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人乙肝病毒增强子ⅡB1结合因子(hB1F)系Ftz-F1(NR5A)亚家族的新成员.经基因重组法将人hb1f cDNA置于小鼠白蛋白增强子/启动子序列下游构建成肝特异重组载体,通过原核显微注射
【机 构】
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第二军医大学医学遗传学教研室,南京军区福州总医院检验中心实验科,中国科学院上海生命科学院生化和细胞生物研究所,上海南方模式生物研究中心,同济大学医学与生命科学部
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人乙肝病毒增强子ⅡB1结合因子(hB1F)系Ftz-F1(NR5A)亚家族的新成员.经基因重组法将人hb1f cDNA置于小鼠白蛋白增强子/启动子序列下游构建成肝特异重组载体,通过原核显微注射将该载体导入小鼠受精卵原核,经注射且状态良好的卵回输至假孕母鼠输卵管.产下仔鼠经PCR和Southern blotting鉴定,同时RT-PCR和Western blotting分析转基因的表达.阳性Founder鼠与正常C57鼠交配以建立转基因纯系小鼠,F1代以PCR法鉴定.结果共获得4只PCR鉴定转基因阳性Founder鼠,其中一只同时经Southern blotting鉴定为阳性.RT-PCR和Western blotting结果显示,外源基因在转基因小鼠的肝组织成功表达.遗传学分析表明,转基因已整合入小鼠基因组并可稳定遗传.
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